1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
理論塔板數(shù)
|
官能團(tuán)
|
基 質(zhì)
|
分離模式
|
粒徑
(μm)
|
尺寸I.D.×L(mm)
|
NH2P-50 4E
|
7500 以上
|
氨基
|
聚乙烯醇
|
正相分離
|
5
|
4.6×250
|
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
最大耐壓(MPa)
|
最大使用流量(mL/min)
|
使用溫度
范圍(℃)
|
使用PH
范圍
|
出廠時(shí)溶劑
|
NH2P-50 4E
|
10.0
|
1.5
|
4~50
|
2~13
|
CH3CN/H2O=75/25
|
標(biāo)準(zhǔn)使用流量:0.5~1.0 mL/min;使用頻率高時(shí),建議在通常流量下使用。
2 使用上的注意事項(xiàng)
聚合物氨基柱與硅膠氨基柱相比,在同樣的流動(dòng)相條件下分離性能高,再現(xiàn)性好。適用于寬的PH 范圍(PH2~13)及各種緩沖液。
Ⅰ 操作注意事項(xiàng)
1) 一定要在規(guī)定的壓力、流量、溫度范圍內(nèi)使用。如果瞬間超過(guò)最高使用壓力、或最
大使用流量,都有可能會(huì)損壞色譜柱。
2) 樣品必須用流動(dòng)相來(lái)配制。對(duì)于流動(dòng)相(如:乙腈/水=75/25)難溶解的樣品,可將
樣品在純水中溶解后,再加乙腈調(diào)成與流動(dòng)相相同的組成。
3) 連接色譜柱之前,對(duì)液相流路系統(tǒng)進(jìn)行充分的清洗。清洗方法如下。
A 流動(dòng)相是極性溶劑/水的情況下
清洗液:NH2P 色譜柱測(cè)試用流動(dòng)相
清洗量:100mL
注意點(diǎn):撥動(dòng)切換閥,對(duì)進(jìn)樣系統(tǒng)也要進(jìn)行清洗。
B 流動(dòng)相是緩沖液的情況下
清洗液:①純水 40mL ②50mM 磷酸水溶液
③純水 40mL ④50mM 氫氧化鈉水溶液 100mL
⑤純水 100mL ⑥NH2P 色譜柱測(cè)定用流動(dòng)相 100mL
注意點(diǎn):撥動(dòng)切換閥,對(duì)進(jìn)樣系統(tǒng)也要進(jìn)行清洗。
C 色譜柱流動(dòng)相置換時(shí),置換流量為0.5mL/min 以下。
4)色譜柱的再生
如果液相流路系統(tǒng)中含有污染填料的成分(金屬離子等),會(huì)引起糖類(lèi)的洗脫異常、
分離性能降低。因此3)流路清洗非常重要。如果出現(xiàn)類(lèi)似的分析異常,可以對(duì)色譜柱進(jìn)
行再生,有可能柱性能會(huì)回復(fù)。再生方法如下。
流量:0.5mL/min
清洗液(清洗時(shí)間): ①純水(10min) ②0.1M 高氯酸溶液(2 hr)
③純水(10min) ④0.1M 氫氧化鈉水溶液(2 hr)
⑤純水(20min) ⑥NH2P 色譜柱測(cè)定用流動(dòng)相(1 hr)
Ⅱ 各種流動(dòng)相使用注意事項(xiàng)
1) 糖分析
① 水、乙腈和乙醇的混合液或各單獨(dú)液的任意比率都可使用。因乙醇水溶液的黏度高,使用流量請(qǐng)低于通常流量。
② 上述的溶液中,也可使用乙腈或乙醇能溶的各種緩沖試劑(如氫氧化四丙基銨、
醋酸、醋酸鈉)。使用時(shí)請(qǐng)確認(rèn)是否有沉淀的析出。
③ PH 使用范圍2~13
2) 作為離子交換色譜柱使用
① 磷酸鹽、醋酸鹽等各種緩沖液及氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉等可同時(shí)使用。
② PH 使用范圍2~13
3) 使用溫度
4℃~50℃范圍下使用。高溫使用時(shí)注意防止生成氣泡。低溫下由于流動(dòng)相黏度升高,建議在低流量下使用。
4)色譜柱的再生(簡(jiǎn)單再生法)
0.1N 的NaOH 水溶液在低于通常流量下以10~20 倍色譜柱體積流過(guò)色譜柱。
堿洗凈后,一定要置換成30~80%的乙腈水溶液后保存。
3 色譜柱性能的測(cè)試方法
按照下面的條件,對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測(cè)試(詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA)
色譜柱
|
流動(dòng)相
|
流量
|
色譜柱溫度
|
樣品
|
注入量
|
NH2P-50 4E
|
CH3CN/H2O=75/25
|
1.0mL/min
|
室溫約30℃
|
5mg/mL Sucrose
|
6μL
|