一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?

本研究利用固相萃取法作為牛奶樣品中三聚氰胺檢測(cè)的前處理方法，HPLC法作為檢測(cè)手段。SimplyGreen  MCX固相萃取柱60mg/3mL柱凈化效果良好，回收率滿足測(cè)試要求，重現(xiàn)性好，與知名廠商同型號(hào)柱性能相當(dāng)。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

三聚氰胺 (CAS:108-78-1)

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于食品中三聚氰胺的HPLC檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

《GB/T 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法》。

五、實(shí)驗(yàn)材料

 SimplyGreen  MCX固相萃取柱60mg/3mL 。

六、實(shí)驗(yàn)方法

1、樣品提取

稱取2.0ｇ試樣(精確至0.001 g)于50 mL離心管中，加入15 mL 1%三***溶液和5 mL乙腈，超聲提取10 min，再振蕩提取10 min，4000 r/min離心10 min。上清液經(jīng)三***溶液潤(rùn)濕的濾紙過(guò)濾后，用三***溶液定容至25 mL，移取5 mL濾液，加入5 mL水混勻后做待凈化液。

2、SPE柱凈化

(1)活化：使用前依次用3 mL甲醇、5 mL水活化柱子。
(2)上樣和洗脫：將待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中。依次用3 mL水、3 mL甲醇洗滌，抽至近干后，用6 mL5%氨化甲醇溶液洗脫。整個(gè)固相萃取過(guò)程流速不超過(guò)1 mL/min。
(3)重新溶解：洗脫液于50 ℃下用氮?dú)獯蹈?，殘留物? mL流動(dòng)相定容，渦旋混合1 min，過(guò)微孔濾膜后，供HPLC測(cè)定。

3、HPLC條件

設(shè)備：Waters Alliance 2690
檢測(cè)器：Waters 2487 雙波長(zhǎng)檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：240 nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動(dòng)相：離子對(duì)試劑緩沖液(準(zhǔn)確稱取2.10 g檸檬酸和2.16 g辛烷磺酸鈉，加入約980 mL水溶解，調(diào)節(jié)PH至3.0后，定溶至1 L備用)-乙腈(80:20, v/v)。
柱溫：室溫
進(jìn)樣體積：20μL
流速：1 mL/min

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、2.5mg/kg牛奶基質(zhì)中三聚氰胺的添加回收結(jié)果
表1 2.5mg/kg牛奶基質(zhì)中三聚氰胺的添加回收結(jié)果